现代药理研究表明,新会陈皮中所含的挥发油、多糖、多酚、黄酮等多类成分都有很好的抗氧化作用。
一、新会陈皮挥发油的抗氧化作用
崔佳韵等对2016、2014、2013、 2011、2006 年5种不同年份新会陈皮挥发油的抗氧化活性进行了评价,利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH) 自由基清除实验、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除实验、羟基自由基清除实验和总还原能力测定实验综合评价不同年份的新会陈皮挥发油的抗氧化能力。结果显示,不同年份的新会陈皮挥发油均表现出DPPH、ABTS、羟基自由基清除能力和还原能力,且抗氧化效果与挥发油的体积分数呈量效关系。并以2014年份的样品具有最好的DPPH和ABTS自由基清除能力;2016年份的样品具有最好的羟基自由基清除能力和总还原能力(图4-1)。
图4-1不同年份新会陈皮挥发油抗氧化能力
高蓓对不同贮藏年份的新会陈皮挥发油抗氧化活性进行了研究,结果认为不同贮藏年份新会陈皮挥发油抗氧化活性变化较大。DPPH 自由基清除能力的强弱顺序是:新会陈皮(2008) >新会陈皮(2001) >新会陈皮(1998) >新会陈皮(2004) >新会陈皮(1994), 新会陈皮(2008) 的DPPH自由基清除能力比其他年份显著增强(P<0.05)。 总抗氧化能力方面,新会陈皮(1994) 的FRAP值最高,为26. 89umol TE/g,而新会陈皮(2008) 值最低, 为11. 36mol TE/g;总抗氧化能力由大到小依次为:新会陈皮(1994)> 新会陈皮(1998) >新会陈皮间的增(2001)>新会陈皮(2004) >新会陈皮(2008),可以看出,随着贮藏时增加,新会陈皮挥发油的总抗氧化能力是逐渐增强的,可能与a-蒎烯、β一蒎烯的含量增加有关。ABTS自由基清除能力由大到小顺序依次为:新会陈皮(2001)>新会陈皮(1998) >新会陈皮(2004) >新会陈皮(2008) >,新会陈皮(1994)。随着贮藏时间的增加,广陈皮挥发油的ABTS自由基清除能力先增强后减弱。新会陈皮(2001) 的ABTS值最高,为26.48μmol TE/g。
二、新会陈皮多糖的抗氧化作用
莫云燕等研究 了新会陈皮多糖体外抗氧化作用,结果显示新会陈皮多糖在体外能明显清除羟自由基、DPPH自由基和还原Fe3+,并且体外抗氧化作用均随其浓度的增而增大,,认为新会陈皮多糖具有明显的体外抗氧化作用。
张小英等探讨了新会陈皮多糖对H2O2诱导的大鼠嗜铬瘤细胞株(PC12)细胞氧化损伤的保护作用,结果发现100μmol/ L H202诱导PC12细胞4小时,细胞呈现明显损伤形态,细胞内MDA含量升高,SOD 和GSH -Px活性降低。新会陈皮多糖可明显改善PC12细胞损伤,显著降低细胞MDA含量,极显著提高SOD 和GSH - Px活性。认为新会陈皮多糖对H202诱导PC12细胞损伤具有明显的保护作用,其作用机制可能与提高PC12细胞的抗氧化酶活性有关。
甘伟发等研究新会陈皮提取物中不同乙醇体积分数沉淀的多糖分子质量分布及其对PC12细胞氧化损伤的保护作用,结果发现新会陈皮粗多糖和透析处理后的多糖都具有一定的抗氧化活性,但脱色和脱蛋白处理后的多糖基本失去抗氧化活性。认为新会陈皮提取物中多糖的分子质量分布对抗氧化活性有一定影响; 多糖的分子组成(例如含有色素和蛋白质)与抗氧化活性存在密切关系。在陈思的研究中也表明新会陈皮粗多糖(CCP)对过氧化氢损伤的U251人胶质瘤细胞有保护作用,在试验浓度2.500 ~0. 078mg/ mL范围内呈剂量依赖关系: CCP 脱蛋白后的多糖则未表现出抗氧化活性。
三、新会陈皮多酚的抗氧化作用
盛钊君等研究并比较了新会柑胎仔、1年青皮、5年陈皮及10年陈皮4种新会柑产品的功能成分及生理功效的差异。以没食子酸为标准品,采用福林酚比色法测定4种样品中的多酚总含量;以维生素C (Vc)为阳性对照品,采用分光光度计法评估4种样品清除DPPH和ABTS自由基的能力(图4 -2)。结果发现4种乙醇提取物的新会陈皮多酚含量从高到低依次是柑胎仔(164μg/mg)、10年陈皮(98μg/mg)、1 年青皮(66ug/mg)、 5年陈皮(58μg/mg); 4种样品清除DPPH自由基的能力从强到弱依次是柑胎仔(IC50= 91μg/mL)、10 年陈皮(IC50=234μg/mL)、5年陈皮(IC50 =384μg/mL)、1年青皮(IC50= 473ug/mL);清除ABTS自由基的能力从强到弱依次是柑胎仔(IC50= 18μg/mL)、1 年青皮(IC50=53ug/mL)、10年陈皮(IC50= 56μg/mL)、 5年陈皮(IC50= 90μg/mL)。认为新会柑胎仔的多酚含量与体外抗氧化活性均远远高于其他3种样品,抗氧化活性结果与多酚含量呈正相关。新会柑胎仔在功能食品的研究和开发中具有较大的应用潜力。
四、新会陈皮黄酮的抗氧化作用
高蓓对比分析不同贮藏年份、不同采收期的广陈皮和不同品种柑橘皮中黄酮类化合物组分和含量差异及其抗氧化活性差异,并研究6种黄酮单体的抗氧化活性,黄酮单体两两组合及有机酸、氨基酸分别与广陈皮黄酮模拟体系之间的抗氧化协同作用,为“陈久者良”和“道地性”提供理论支持。结果表明,广陈皮抗氧化能力随贮藏时间增加总体呈下降趋势,不同贮藏年份广陈皮的总黄酮含量与DPPH自由基清除能力和ABTS自由基清除能力呈正相关,而与铁离子还原/抗氧化能力法(FRAP)铁还原能力相关性不明显。不同采收期广陈皮抗氧化能力为:青皮>微红皮>大红皮;不同采收期广陈皮的总黄酮含量与DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和FRAP铁还原能力呈正相关性。不同品种柑橘皮抗氧化能力存在一定的差异,南丰橘的抗氧化能力最强。对不同品种柑橘皮来说,其总黄酮含量和DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和FRAP铁还原能力之间的相关性都不强,其中,总黄酮含量和DPPH自由基清除能力之间的相关系数最大,为0.5044。同时,采用ABTS法和FRAP法测定广陈皮中6种黄酮化合物单体的抗氧化活性,分析了单体化合物两两之间、5种有机酸和20种氨基酸分别与广陈皮黄酮模拟体系之间的抗氧化协同效应。结果表明,6种黄酮类化合物中,橙皮苷的抗氧化活性最强,其次是5-羟基-6,7,8,3',4’-五甲氧基黄酮。单体化合物两两组合时,ABTS值除4’,5,7,8-四甲氧基黄酮和5-羟基-6,7,8,3',4' -五甲氧基黄酮两两混合表现为协同效应外,其他4种单体化合物均表现为拮抗效应,当川陈皮素与其他化合物混合时拮抗效应较理论值显著增强(P <0.05); FRAP值各单体均表现出显著的协同效应(P<0.05),其中橙皮苷的协同效应最强。各有机酸和氨基酸在广陈皮黄酮类化合物模拟体系中主要表现为拮抗效应,仅组氨酸和精氨酸显示出协同效应。
黄庆华课题组对新会陈皮提取物进行了体外抗氧化实验和动物实验,发现提取物对D-半乳糖致衰老模型小鼠有显著效应,能使血、肝和脑的丙二醛(MDA)含量降低,使脑组织、血浆、肝组织超氧化歧化酶(SOD)活力提高,使血液中的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力提高。
李娆玲应用中药血清药物化学研究的思路,对灌胃新会陈皮大鼠血清中提取物的原型成分进行分离及鉴定;从提取物中分离提纯出6个多甲氧基黄酮类化学成分,其中4个成分被检出为入血的原型成分,并构建了细胞的氧化应激损伤模型,对6个多甲氧基黄酮类成分和提取物进行了抗氧化活性的细胞筛选试验。实验结果表明,H2O2诱导PC12细胞后与正常对照组比较,MDA含量升高,GSH -Px和SOD活性降低,证明已成功构建PC12细胞体外氧化应激模型。而受试成分处理组对SOD和GSH-Px活性降低具有抑制作用,并使MDA含量降低。入血成分对细胞的这种保护作用较未入血的成分明显。推测新会陈皮提取物中的多甲氧基黄酮类成分,可能通过提高SOD和GSH-Px活性和降低MDA含量,减少氧化应激对神经细胞的损伤,从而发挥抗氧化作用。
另有报道对新会陈皮所含成分川陈皮素的抗氧化作用进行研究,认为其作用主要是通过干扰NF - kB DNA结合活性因子及抑制活性氧的产生,而起到抗氧化效应。同样地,川陈皮素能够抑制有机自由基和羟自由基的产生,抑制由LPS激活的RAW 264. 7细胞中NF一kB DNA结合活性因子和活性氧的繁殖,从而影响由LPS诱导的细胞内的活性氧的产生,并呈现量效关系。
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